Terletak di Kabupaten Enrekang, Sulawesi Selatan. Luasnya sekitar 12 hektare, berada di ketinggian ±500–600 mdpl. Lokasinya di kawasan perbukitan kaki Gunung Latimojong, dengan iklim pegunungan tropis sejuk, suhu rata-rata 20–25 °C.
Wilayah kebun raya berbukit dengan kontur bergelombang, tanah vulkanik yang subur, serta panorama pegunungan Latimojong. Lanskapnya mendukung ekosistem hutan hujan tropis dataran menengah.
Koleksi tumbuhan difokuskan pada flora pegunungan Sulawesi, termasuk anggrek hutan, bambu, dan pohon endemik Latimojong. Kebun Raya Massenrempulu juga berperan dalam konservasi tumbuhan langka Sulawesi dan sebagai pusat edukasi lingkungan.